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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
染料法熒光定量PCR試劑盒（上海研生）
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
染料法熒光定量PCR試劑盒運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，有效期一年。使用本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照時(shí)，由于其濃度較高，一定要注意不要污染其他試劑和成分。在專門的區(qū)域操作。
產(chǎn)品型號(hào)：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：4157
更新時(shí)間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
相對(duì)定量分析方法 ：
2-ΔΔCt
染料法熒光定量PCR試劑盒前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test）
ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator）
2、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
具有下列特點(diǎn)：
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物，與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個(gè)數(shù)量級(jí)，可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.即開即用，用戶只需要提供樣品模板，操作簡(jiǎn)單，定量準(zhǔn)確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)，避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
Inhibin alpha antibody [EPY2782]原裝、分裝型肝炎核心抗原（HBV）（18-27）
Inhibin alpha antibody [EPY2782]原裝、分裝型肝炎病毒核心（107-115）
SRPRB antibody原裝、分裝型肝炎病毒核心，（型肝炎抗原31）
TMEM35 antibody原裝、分裝型肝炎病毒核心蛋白（128-140）
PIEZO2 antibody原裝、分裝型肝炎病毒膜蛋白（183-191）
tenomodulin antibody原裝、分裝型肝炎病毒膜蛋白（335-343）
JAM-C antibody原裝、分裝型肝炎病毒聚合酶（455-463）
Human SLC5A4 peptide原裝、分裝型肝炎病毒聚合酶（502-510）
IRHOM1 antibody原裝、分裝型肝炎病毒聚合酶（655-663）TIMP1 antibody [EP1549RY]原裝、分裝胃泌素釋放肽，人
AKT1 (phospho S473) antibody [EP2109Y]原裝、分裝胃泌素釋放肽，豬
AKT1 (phospho S473) antibody [EP2109Y]原裝、分裝胃泌素釋放肽-Lys（生物素），人
AKT1 (phospho S473) antibody [EP2109Y]原裝、分裝胃泌素釋放肽（1-6），人
Phospholipase C gamma 1/PLC-gamma-1 (phospho Y1253) antibody [EP1502Y]原裝、分裝胃泌素四肽
Phospholipase C gamma 1/PLC-gamma-1 (phospho Y1253) antibody [EP1502Y]原裝、分裝胃饑餓素，人
Phospholipase C gamma 1/PLC-gamma-1 (phospho Y1253) antibody [EP1502Y]原裝、分裝胃饑餓素，大鼠
MMP26 antibody [EP1283Y]原裝、分裝生長(zhǎng)激素釋放子，小鼠
MMP26 antibody [EP1283Y]原裝、分裝生長(zhǎng)激素釋放子，綿羊
染料法熒光定量PCR試劑盒基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B檢測(cè)試盒20mg
基質(zhì)金屬蛋白酶抑制子2檢測(cè)試盒20mg
基質(zhì)金屬蛋白酶抑制子3檢測(cè)試盒20mg
基質(zhì)金屬蛋白酶抑制子4檢測(cè)試盒20mg
基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制子1檢測(cè)試盒5mg
基質(zhì)裂解蛋白/基質(zhì)溶素檢測(cè)試盒50mg
基質(zhì)細(xì)胞衍生子1a檢測(cè)試盒20mg
基質(zhì)細(xì)胞衍生子1β檢測(cè)試盒100mg
激動(dòng)異構(gòu)酶/細(xì)胞分裂素MB檢測(cè)試盒0.2ml
注意事項(xiàng)：
1. 建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織，若為長(zhǎng)期冷凍組織，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解，影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存，易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時(shí)間，也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min，以溶解沉淀，混勻后再使用。
3. 電泳檢測(cè)時(shí)，切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則，電泳時(shí)會(huì)在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長(zhǎng)度1 kb以內(nèi)，以便擴(kuò)增效率佳。
?5. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
